In vitro, ex vivo, and clinical evaluation of anti-aging gel containing EPA and CBD

In vitro, ex vivo и клиническая оценка антивозрастного геля, содержащего EPA и CBD

Гай Коэн, Жаннетт Джакус, Маурисио Портильо, Раанан Гвирц, Навит Оген-Штерн, Эльдад Зильберштейн, Томер Айзенберг, Шарон Розенблат

Journal of Cosmetic Dermatology, 2023, №6, 1-11, https://doi.org/10.1111/jocd.15815 

Открытое исследование

АННОТАЦИЯ

Справочная информация

Проявления старения кожи, такие как грубые морщины, потеря эластичности, пигментация и грубая текстура, представляют собой многофакторный процесс, который может усугубляться загрязнением воздуха, курением, плохим питанием и воздействием солнца. Воздействие ультрафиолетового излучения считается основной причиной внешнего старения кожи и составляет около 80% случаев старения лица. Внешние признаки старения кожи можно уменьшить с помощью демонстрационных косметических составов. И каннабидиол (CBD*), и эйкозапентаеновая кислота (EPA**) ранее предлагались в качестве мощных активных дерматологических ингредиентов.

Цели

Целью текущего исследования была оценка совместимости обоих средств в профилактике и лечении старения кожи. Во-первых, воздействие обоих агентов оценивали с использованием стандартных моделей фотостарения повреждений, вызванных ультрафиолетом, как in vitro (клетки HaCaT), так и ex vivo (культура органов кожи человека). Затем было проведено клиническое валидационное исследование (n = 33) с использованием оптимизированной рецептуры крема для местного применения, протестированного в разные моменты времени (вплоть до 56-го дня).

Результаты

Было обнаружено, что EPA усиливает защитные эффекты CBD за счет снижения секреции простагландина E2 (PGE2) и интерлейкина-8 (IL-8), двух основных воспалительных агентов, связанных с фотостарением. Кроме того, качественное гистологическое исследование показало, что нанесение крема может привести к увеличению ремоделирования внеклеточного матрикса (ECM) после ультрафиолетового излучения. Клинически это также было подтверждено уменьшением площади и объема морщин "гусиные лапки", а также уменьшением объема мелких морщин, измеренных системой AEVA. Хорошо известная возрастозависимая субэпидермальная низкоэхогенная полоса (SLEB) также была снижена на 8,8%. Дополнительные клинические результаты показали значительное уменьшение площади и количества красных пятен, а также увеличение увлажненности и эластичности кожи на 31,2% и 25,6% после 56 дней применения крема соответственно. Эти впечатляющие клинические результаты коррелировали с высокими оценками удовлетворенности участников исследования.

Обсуждение и выводы

В совокупности результаты демонстрируют глубокое антивозрастное воздействие разработанной рецептуры и усиливают полезные дермокосметические свойства продуктов на основе CBD.

РЕЗЮМЕ

Результаты этого исследования демонстрируют эффективность недавно разработанного геля в уменьшении возрастных проявлений. Кроме того, была обнаружена высокая корреляция между in vitro, ex vivo и клиническим исходом. Это свидетельствует о том, что результаты на модели культивирования органов кожи человека (ex vivo) можно легко преобразовать в клинический результат. Увеличение увлажненности и эластичности кожи, а также уменьшение образования морщин от разработанного крема EPA-CBD коррелирует с недавними данными о антивозрастном и полезном косметическом применении средств.

ВЫДЕРЖКИ

Для исследования способности тестируемых ингредиентов in vitro и ex vivo как клетки HaCaT, так и ткани кожи человека подвергали воздействию ультрафиолетового излучения (лампа VL-6.M, спектр излучения UVB в средневолновом диапазоне 280-350 нм, пик излучения 312 нм, спектролайн). Образцы кожи человека были получены у здоровых женщин в возрасте от 40 до 60 лет, перенесших эстетическую операцию на брюшной полости. Перед облучением клетки и ткани переносили в PBS, содержащий 6-луночное покрытие. Сразу после воздействия ультрафиолетовым излучением (25 и 350 МДж/см2 для HaCaT и кожи соответственно) на ткань местно наносили 3 мкг/см2 крема или композиции placebo, в то время как в среду для культивирования клеток добавляли CBD (10 мкг/мл; Echo pharmaceuticals), EPA (10 мкг/мл KD pharma) или оба (соотношение 1:1). Солнцезащитный крем spry (SPF-15; skingard careline) и ПАБК (0,02 мг/мл; Merck, Израиль) использовались в качестве положительного контроля для блокирования UVB-излучения в тканевых и клеточных культурах соответственно. Все процедуры применялись после воздействия ультрафиолетовым излучением в течение 24 ч, исключая положительный контроль, который применялся за 30 мин до облучения. Рецептура для местного применения (используемая как при оценке культуры органов ex vivo, так и клинически) была подготовлена Echo Pharmaceuticals. Добавка к стандартной базовой композиции (плацебо), (0,1%) CBD, (0,1%) рыбий жир, эйкозапентаеновая кислота (EPA) и экстракт корня Salvia miltiorrhiza (Labiatae; 0,1%; Draco Natural Products) показали при предварительном скрининге высокую совместимость с препаратами. 

Чтобы оценить, может ли комбинация двух средств защитить от старения кожи, были проведены in vitro, ex vivo и клинические оценки. Сначала была использована стандартная модель фотостарения для оценки повреждения, вызванного UVB in vitro. Кератиноциты HaCaT стимулировали UVB и измеряли уровень простагландина E2 (PGE2) и IL-8 . Эти биомаркеры были выбраны, поскольку было показано, что оба играют ключевую роль в воспалении, вызванном UVB. Результаты показывают, что только CBD способен ослаблять оба иммунных медиатора. Эти результаты параллельны предыдущим исследованиям, которые продемонстрировали противовоспалительное действие CBD.

 Важно отметить, что добавки EPA усиливали эффекты CBD и увеличивали ингибирующий потенциал. Интересно, что предыдущие исследования показали, что EPA может уменьшать воспалительные процессы, а также экспрессию ЦОГ-2.

В связи со значительными результатами in vitro и ex vivo клиническая оценка крема, содержащего CBD и EPA, была проведена на 33 здоровых добровольцах (45 – 65 лет) с возрастными признаками. Фототип оценивали в соответствии с Fitzpatrick, установленным по принципу первого 30-40-минутного пребывания на солнце после зимы . Учитывали жизнеспособность эпидермиса и клеток, характеристики коллагена и эластина, а также данные ответ пациентов.

Было обнаружено, что EPA усиливает защитные эффекты CBD за счет снижения секреции простагландина E2 (PGE2) и интерлейкина-8 (IL-8), двух основных воспалительных агентов, связанных с фотостарением. Кроме того, качественное гистологическое исследование показало, что нанесение крема может привести к увеличению ремоделирования внеклеточного матрикса (ECM) после ультрафиолетового излучения.

Результаты показывают постепенное, зависящее от времени, уменьшение морщин. Как линии морщин, так и объем, прилегающий к боковым эпикантальным складкам, значительно улучшились. В совокупности эти результаты показали явное уменьшение признаков старения. Почти все пациенты показали высокую удовлетворенность результатами применения продукта на основе ответов на вопросник. Результаты, полученные в результате исследований in vitro, ex vivo и клинических испытаний, свидетельствуют о значительном антивозрастном действии крема CBD-EPA. 

______

*   СВД – каннабидиол

** EPA - эйкозапентаеновая кислота