ВЭТСХ идентификация растительных масел

ВЭТСХ идентификация растительных масел

Европейская фармакопея (European Pharmacopoeia*) предоставляет возможность для идентификации масел методом ТСХ.

Метод высокоэффективной тонкослойной хроматографии (ВЭТСХ) или HPTLC  (в английской

транскрипции) может использоваться для оценки подлинности и исследования растительного

 сырья, а также масел наряду с газовой хроматографией (ГХ). ВЭТСХ , в отличие от ГХ, требует меньше времени и позволяет проводить анализ масел по количеству ненасыщенных кислот. ВЭТСХ метод также используется судмедэкспертизе для качественной и количественной оценки  содержания ТГК в продуктах и растительном сырье, в том числе растениях конопли.

Суть заключается в разделении  компонентов пробы масла  на пластинах с силикагелем с их последующей фиксацией и окраской. Среди  протестированных автоматических и полуавтоматических  приборов для ТСХ масел хорошие стабильные результаты идентификации растительных масел, которые удовлетворяют требованиям Фармакопеи,  показывает оборудование  CAMAG Laboratory. 

Предлагается несколько методик ВЭТСХ идентификации масел (европейская и американская) с помощью этого оборудования. Например,  методика (Глава 2.3.2.), адаптированная для работы с нанесением пробы методом распыления и элюирования в вертикальной стеклянной камере (или ADC2).

Для приготовления испытуемой пробы, 20 мг опытного образца масла растворяют в 3 мл дихлорметана

Стандартный образец (тест пригодности системы(SST) -  готовят, растворив 20мг подсолнечного масла в 3мл дихлорметана.

Краситель готовят следующим образом: 10 г фосфорномолибденовой кислоты в

растворяют в 200мл 96% этанола

Хроматографию проводят на Пластинах HPTLC plates silicagel 60, RP18F254 (Merck), 20x10 см ПФ в системе: дихлорметан, УК, ацетон (20:40:50).

На пластины штрихом шириной 8 мм, с отступом справа 20 мм, и 8 мм от нижнего края пластины наносят 2 мкл испытуемого раствора. Режим разгона компонентов (элюирование): 20x10 см Twin Trough Chamber (ADC2), насыщают 20 мин (с фильтровальной бумагой);  дистанция фронта 80 мм от нижнего края пластины.

По окончании хроматографирования пластины 5 мин сушат холодным воздухом, после чего окрашивают. Пластину нагревают 2 мин при 100°C и затем на 1 секунду опускают в раствор реагента для окрашивания. Повторно сушат 3 мин 120C и проводят  визуальную аналитическую оценку хроматограмм.

Пример сравнительной экспертизы  масел с помощью ВЭТСХ

1-4 масло подсолнечника,  5-10  масло оливы, 11-14 масло рапса

Другая методика аналогична, но рекомендует иные концентрации пробы и растворов

 Хроматограмма в результате имеет следующий вид:

-------------------------------------------- 

* European Pharmacopoeia 6.0, p.106; Councilof Europe, Strasbourg 2008