Криоконсервация пыльцы конопли

Метод искусственного опыления наряду с клонированием является одним из способов размножения и сохранения штаммов  конопли Cannabis sativa. Поэтому длительная сохранность пыльцы и поддержание желаемой активности зародышевой плазмы чрезвычайно важны для селекционеров, производителей посевного материала, исследователей, в том числе для  дальнейшего использования материала в селекции, биотехнологии или генетическом редактировании материала.

Канадские ученые Университета Летбридж (Альберта) - Даниэль Годе, Нарендра Сингх Ядав, Алексей Сорокин, Андрей Биличак, Игорь Ковальчук разработали протокол криоконсервации высушенной под вакуумом пыльцы в жидком азоте. Чтобы сохранить пыльцу, исследователи удалили влагу, поместив ее в обожженную цельнозерновую пшеничную муку и консерванты, а затем заморозили ее в жидком азоте. 

Перед использованием удаляли жидкий азот из замороженной пыльцы, а затем наносили ее на цветущие женские растения. Процедура приводила к успешному образованию семян на всех опытных экземплярах. Тесты показали, что всхожесть всходов в жидком азоте можно сохранить в течение 4 месяцев.

Исследователи также расшифровали бицеллюлярную природу пыльцы каннабиса с помощью окрашивания DAPI и стандартизировали анализ прорастания пыльцы и оценки ее жизнеспособности. Также было установлено, что пыльца, собранная на разных основных стадиях цветения, проявляет разную продолжительность жизни и имеет разную степень жизнеспособности. Было предложено наиболее оптимальное время для забора пыльцы - середина цветения. Такая пыльца сохраняет «наибольшую жизнеспособность»:  22% пыльцевых зерен успешно прорастает после 21 дня хранения в низкотемпературной среде.

Источник